分光光度計(jì)的使用

儀器千里

分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)光的吸收特性進(jìn)行定性和定量分析的儀器，廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、**等領(lǐng)域。其使用步驟如下：
一、前期準(zhǔn)備
樣品處理
液體樣品：確保澄清無(wú)雜質(zhì)(若渾濁需離心或過(guò)濾)，根據(jù)檢測(cè)需求稀釋至合適濃度(避免吸光度超出儀器線(xiàn)性范圍，通常 0.2-0.8 為宜)。
固體樣品：需溶解或制成均勻懸液，選擇合適溶劑(如蒸餾水、乙醇等)。
儀器檢查
確認(rèn)電源連接正常，開(kāi)機(jī)前檢查比色皿是否清潔(避免指紋、劃痕，可用擦鏡紙擦拭)，配套比色皿需配對(duì)使用(減少誤差)。
二、操作步驟
開(kāi)機(jī)預(yù)熱
打開(kāi)主機(jī)電源，選擇測(cè)量模式(如 “吸光度”“透光率”)，設(shè)置所需波長(zhǎng)(根據(jù)樣品最大吸收峰確定，如核酸在 260nm，蛋白質(zhì)在 280nm)，預(yù)熱 15-30 分鐘(保證光源穩(wěn)定)。
空白校正
將裝有溶劑(如溶解樣品的蒸餾水)的比色皿放入樣品室，確保光路對(duì)準(zhǔn)比色皿透光面，蓋好蓋子。
按 “空白” 或 “調(diào)零” 鍵，使儀器顯示吸光度為 0(透光率 100%)，消除溶劑對(duì)光的吸收干擾。
樣品測(cè)量
將待測(cè)樣品注入比色皿(約 2/3 容積，避免溢出)，擦凈外壁后放入樣品室，記錄吸光度(或透光率)數(shù)值。
同一樣品建議測(cè)量 3 次取平均值，減少偶然誤差。
數(shù)據(jù)記錄與計(jì)算
若用于定量分析，需先繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(測(cè)量一系列已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，建立濃度與吸光度的線(xiàn)性關(guān)系)，再根據(jù)樣品吸光度代入曲線(xiàn)計(jì)算濃度。
三、注意事項(xiàng)
比色皿使用：避免用手觸摸透光面，強(qiáng)酸強(qiáng)堿樣品需用石英比色皿(玻璃比色皿不適用于紫外區(qū))。
儀器維護(hù)：測(cè)量完畢后，及時(shí)取出比色皿，倒出樣品并清洗(特殊樣品需用專(zhuān)用溶劑清洗)，關(guān)閉儀器時(shí)先關(guān)主機(jī)再斷電源。
誤差控制：同一批實(shí)驗(yàn)需使用同一臺(tái)儀器、同一套比色皿，避免波長(zhǎng)或溫度波動(dòng)影響結(jié)果。
通過(guò)以上步驟，可快速實(shí)現(xiàn)樣品的濃度測(cè)定或純度分析，核心是利用 “朗伯 - 比爾定律”(吸光度與物質(zhì)濃度成正比)，確保操作規(guī)范能顯著提高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

往年今日

感謝作者分享這么有價(jià)值的內(nèi)容，讓我受益匪淺。

qio912

這個(gè)問(wèn)題我也在研究，你的觀點(diǎn)給了我新思路。