紫外光度計空白管調(diào)零步驟

威高力儀器儀表

紫外光度計的空白管調(diào)零（基線校正）是確保測量準確性的關(guān)鍵步驟，其目的是消除溶劑、比色皿和其他背景因素對吸光度的影響。以下是詳細操作步驟及注意事項：

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操作步驟

• 準備空白溶液
  
  
  • 空白液需與待測樣品的溶劑完全一致（如水、緩沖液、乙醇等）。
  • 確?？瞻滓撼吻逋该?，無雜質(zhì)或氣泡（必要時可過濾或離心）。
    
    
• 儀器預(yù)熱
  • 打開紫外光度計電源，預(yù)熱儀器至穩(wěn)定狀態(tài)（通常需15-30分鐘，具體時間參考說明書）。
  • 預(yù)熱可減少光源波動和檢測器噪聲對測量的影響。
    
    
• 設(shè)置測量波長
  • 將儀器波長調(diào)節(jié)至實驗所需波長（如測定DNA時設(shè)為260 nm）。
  • 若需多波長測量，每次更換波長后需重新調(diào)零。
    
    
• 校正比色皿配對性（可選）
  • 對于高精度測量，建議使用同一批次的比色皿。
  • 裝入空白液至所有比色皿，測量吸光度差異，選擇匹配度高的比色皿。
    
    
• 裝入空白液
  • 將空白液倒入比色皿至約3/4高度，避免溢出。
  • 用擦鏡紙或無塵布清潔比色皿透光面，確保無指紋、水漬或劃痕。
  • 正確放置比色皿：標記面朝向光路方向（通常為儀器標示的箭頭側(cè)）。
    
    
• 調(diào)零（基線校正）
  • 將空白比色皿放入樣品室，關(guān)閉蓋子（避免雜散光干擾）。
  • 按下儀器面板的 “Zero” 或 “Auto Zero” 鍵，儀器自動將當前吸光度歸零。
  • 部分儀器需先選擇“空白校正”模式再按確認鍵，具體操作參考說明書。
    
    
• 驗證調(diào)零效果
  • 取出空白比色皿，重新放入并測量吸光度，正常值應(yīng)在 0.000 ± 0.002 范圍內(nèi)。
  • 若偏差較大，需檢查：
    • 比色皿是否清潔或損壞；
    • 空白液是否與樣品溶劑一致；
    • 儀器光路是否被遮擋或有異物。
      
      
    
    
  
  

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注意事項

• 比色皿使用規(guī)范：
  
  
  • 手持比色皿時避免接觸透光面，建議戴手套操作。
  • 不同溶劑使用專用比色皿（如石英比色皿用于紫外區(qū)，玻璃比色皿僅用于可見光區(qū)）。
    
    
• 環(huán)境控制：
  • 避免強光直射儀器，防止環(huán)境溫度劇烈波動。
    
    
• 異常處理：
  • 若調(diào)零后吸光度漂移，可能是光源老化或檢測器故障，需聯(lián)系維修。
    
    
  
  

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常見問題解決

• 調(diào)零后讀數(shù)不穩(wěn)定：檢查比色皿是否完全干燥，或重新注入空白液排除氣泡影響。
• 吸光度無法歸零：確認波長設(shè)置正確，或更換空白液（如溶劑揮發(fā)導致濃度變化）。
• 儀器顯示錯誤代碼：參考說明書排查原因，常見問題包括光閘未開或比色皿未放入到位。
  
  

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通過規(guī)范操作和定期維護（如清潔樣品室、校準波長），可確保紫外光度計的測量精度和長期穩(wěn)定性。

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